细胞学、DNA倍体分析及细胞蜡块在胸腹腔积液病理学诊断中的应用_论文

发布时间:2021-11-28 12:59:13

202 囯 际 检 验 医 学 杂 志 2018年 1 月 第 3 9 卷 第 2 期 Int J Lab Medjanuary 2018,V〇1.39,N〇.2 ?短篇论著? 细 胞 学 、d n a 倍 体 分 析 及 细 胞 蜡 块 在 胸 腹 腔 积 液 病 理 学 诊 断 中 的 应 用 ^ 邓晓红,石新兰八,崔铁莉,李振强,亢紫涵,贾 静 ,李玉广,常亚娅 (首都医科大学石景山教学医院北京市石景山医院病理科,北 京 100043) 摘 要 :目 的 探 讨 细 胞 学 、D N A 倍体分析及细胞蜡块在胸腹腔积液病理诊断中的应用价值。方 法 收 集 该 院 2015年 9 月 至 2017年 3 月送检查找瘤细胞的胸腹腔积液标本2 0 6 例 ,进行离心涂片、细 胞 D N A 倍体 分析、细胞蜡块切片H E 染色及相关免疫细胞化学染色。结 果 恶 性 胸 腹 腔 积 液 4 5 例 ,其 中 ,细胞涂片找到瘤 细 胞 2 5 例 (55. 5 6 % ) ; D N A 倍体异常细胞阳性3 7 例 (82. 2 2 % ) ; 离心沉渣包埋细胞蜡块切片4 0 例 ,细胞多而集 中,细胞形态清楚并具有一定的组织结构,背景清晰,能较好地满足诊断。3 0 例进一步行免疫细胞化学染色,均 能明确肿瘤细胞来源。结 论 常 规 细 胞 涂 片 结 合 D N A 倍体分析及细胞增块技术可有效提高肿瘤细胞的检出 率 ,免疫细胞化学染色在胸腹腔积液细胞病理诊断、鉴别诊断及确定肿瘤细胞来源方面具有重要价值。 关键词:胸腹腔积液; 细胞增块; D N A 倍体分析; 免疫细胞化学 D O I:10. 3969/j .issn.1673-4130. 2018. 02. 024 中图法分类号:R 734.2 文 章 编 号 :1673-4130(2018)02-0202-03 文 献 标 识 码 :B 胸腹腔积液是全身性疾病及胸腹部疾病常见并发 症 ,而脱落细胞学诊断是明确胸腹腔积液病因的重要手 段 。传统脱落细胞学诊断恶性胸腹腔积液特异度高,但 是灵敏度较差。结 合 D N A 倍体分析,制作细胞蜡块并 辅助以免疫组化和分子检测,可有效提高胸腹腔积液肿 瘤细胞检出率,并可进一步明确肿瘤的诊断、鉴别诊断、 判断细胞来源及辅助临床用药治疗[>3]。 1 资料与方法 1.1 一 般 资 料 收 集 本 院 2 0 1 5 年 9 月 至 2 0 1 7 年 3 月临床科室送检的胸腹腔积液2 0 6 例 ,其中胸腔积液 124例 ,腹腔积液8 2 例 ,男 127例 ,女 7 9 例 ,年 龄 45? 9 1 岁 ,恶性胸/腹 腔 积 液 4 5 例 (21. 8 5 % ) ,良性胸/腹 腔 积 液 161例 (78. 1 6 % ) 。恶性胸腔积液病因主要为 肺腺癌,良性胸腔积液病因主要是结核性胸膜炎,恶 性腹腔积液病因主要是女性生殖系统肿瘤及胃肠道 肿 瘤 ,良性腹腔积液病因主要是肝硬化。 1 . 2 仪 器 与 试 剂 兰 丁 细 胞 D N A 定 量 分 析 仪 。福 尔根染色法的D N A 染 液 购 于 武 汉 兰 丁 公 司 ;细胞保 存 液 购 于 北 京 奥 特 邦 润 生 物 科 技 有 限 公 司 ;所有的免 疫组化试剂均购于自北京中杉金桥生物制品有限 公司。 1 . 3 方 法 (1)取 适 量 胸 腹 腔 积 液 于 50 m L 离心管 中,2 000 r /m in 离 心 5 m in ,弃上清 液 ;向沉渣中加人 适 量 保 存 液 充 分 混 合 均 匀 后 ,取 适 量 沉 渣 混 合 液 制 作 2 张薄层液基细胞学涂片,其中一张行福尔根染色,经 D N A 倍体分析系统进行D N A 倍体 分 析 ,另一张行巴 氏染色以观察细胞形态;剩 余 沉 渣 混 合 液 再 次 离 心 5* m in ,弃上清液,将沉渣常规脱水、浸蜡、包 埋 ,制 作 H E 染色切片。(2)T C T 涂片及 细 胞 块 病 理 诊 断 :所有病 例的胸腔积液T C T 涂片及细胞块切片均经2 位病理 医 师 仔 细 阅 读 ,在 涂 片 和 /或 切 片 中 出 现 呈 腺 腔 样 、实 性巢团状或单个散在排列的异型细胞即诊断为恶性 胸 腹 腔 积 液 ,结 合 细 胞 形 态 及 免 疫 表 型 确 定 肿 瘤 细 胞 来 源 。(3)采 用 免 疫 组 化 PV-6000法 对 3 0 例胸腹腔 积 液 细 胞 块 进 行 了 细 胞 角 蛋 白 (C K ) 、波 形 蛋 白 (V im ) 、细胞角蛋白7(C K 7)、细 胞 角 蛋 白 20(C K 20)、 钙视网膜蛋白(CR)、细 胞 角 蛋 白 5(C K 5)、癌胚抗原 (C E A ) 、甲状腺转录因子1(T T F -1)、肺泡上皮标记物 (NapSinA) 、W iln/ s 肿瘤基因(W T -1),转录配对盒子 基 因 8(P A X 8 ) ,绒 毛 蛋 白 (V illin ) ,同 源 蛋 白 CDX2, 抑 癌 基 因 P53、细胞核增值抗原K i6 7 等抗体染色。 1 . 4 结果判读 (l )D N A 倍 体 分 析 系 统 可 对 每 例 4 000个 以 上 细 胞 核 进 行 自 动 聚 焦 测 定 ,二倍体细胞 (G /G J D N A 含 量 为 2c ,当 D N A 含 量 为 4c 时 ,多为 四 倍 体 细 胞 (G2/M 期 ),当 有 3 个 以 上 D N A 含量 为> 5 c 的细胞或当异倍体细胞D N A 含 量 在 2?4c 之 间形成峰时,即可诊断为恶性。(2)D N A 倍体异常细 胞 数 量 N :未 见 D N A 倍 体 异 常 细 胞 (N = 0);少量 D N A 倍体异常细胞(0 < N < 3 ) ; 可 见 D N

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